通過實(shí)驗(yàn)，學(xué)習(xí)纖維的縱向制片，用 Y172 型哈氏切片器制作纖維斷面，了解普通生物顯微鏡的構(gòu)造并掌握正確使用方法。

 

生物顯微鏡，Y172 型哈氏切片器，刀片，火棉膠，甘油，擦鏡紙，載玻片，蓋玻片。

 

纖維若干

 

取試樣一束，以手扯法整理平直，用右手拇指與食指夾取纖維約 20～30 根，按在載玻片上，用左手覆上蓋玻片，這樣使夾取的纖維平直地按在載玻片上。然后，在蓋玻片的兩端涂上膠水，使蓋玻片粘著并增加視野的清晰度。

哈氏切片器結(jié)構(gòu)如圖 3—1 所示，它主要有兩塊金屬底板，左底板上有凸舌，右底板上有凹槽，兩塊底板嚙合時(shí)，凸舌和凹槽之間留有一定大小的空隙，試樣就放在空隙中。空隙的正上方，有與空隙大小相一致的小推桿，用精密螺絲控制推桿的位置。切片時(shí)，轉(zhuǎn)動精密螺絲，推桿將纖維從底板的另一面推出，推出的距離（即切片的厚度）由精密螺絲控制。

用哈氏切片器制作纖維斷面切片時(shí)的操作步驟如下：

1.取哈氏切片器，旋松定位螺絲，并取去定位銷，將螺座轉(zhuǎn)到與右底板成垂直的定位（或取下），將左底板從右底板上抽出。

 

圖 3—1 Y172 型纖維切片器

1—金屬板（凸槽） 2—金屬板（凹槽） 3—精密螺絲

4—螺絲 5—銷子 6—螺座

 

2．取一束試樣纖維，用手扯法整理平直，把一定量的纖維放入左底板的凹槽中，將右底板插入，壓緊纖維，放入的纖維數(shù)量以輕拉纖維束時(shí)稍有移動為宜。

3．用鋒利的切片切去露在底板正、反兩面外邊的纖維。

4．轉(zhuǎn)動螺座恢復(fù)到原來位置，用定位銷加以固定，然后旋緊定位螺絲。此時(shí)，精密螺絲下端的推桿應(yīng)對放入凹槽中的纖維束的上方。

5．旋轉(zhuǎn)精密螺絲，使纖維束稍稍伸出金屬底板表面，然后在露出的纖維束上涂上一層薄薄的火棉膠。

6．待火棉膠凝固后，用鋒利刀片沿金屬底板表面切下第一片切片。在切片時(shí)，刀片應(yīng)盡可能平靠金屬底板（即刀片和金屬底板間夾角要小），并保持兩者間夾角不變。由于第一片切片厚度無法控制，一般舍去不用。從第二片開始作正式試樣切片，切片厚度可由精密螺絲控制（大概旋轉(zhuǎn)精密螺絲刻度上的一格左右）。用精密螺絲推出試樣，涂上火棉膠，進(jìn)行火棉膠，進(jìn)行切片，選擇好的切片作為正式試樣。

7．把切片放在滴有甘油的載玻片上，蓋上蓋玻片，在載玻片左角上貼上試樣名稱標(biāo)記，然后放在顯微鏡下觀察。

注 1 切片制作時(shí)，羊毛切取較為方便，細(xì)的其他纖維切取較為困難，因此，可反其他纖維包在羊毛纖維內(nèi)進(jìn)行切片，這樣容易得到好的切片。

注 2 制作切片時(shí)，原則上纖維厚度應(yīng)小于或等于橫向尺寸（纖維直徑或?qū)挾龋�，以免纖維倒伏，在顯微鏡下觀察到的是一小段一小段的纖維縱向形態(tài)。

顯微鏡結(jié)構(gòu)如圖 3—2 所示

圖 3—2 顯微鏡結(jié)構(gòu)圖

1—底座 2—鏡臂 3—粗調(diào)裝置 4—鏡筒 5—載物臺 6—集光器 7—目鏡 8—物鏡

9—物鏡轉(zhuǎn)換器 10—微調(diào)裝置 11—移動裝置 12—光闌

 

顯微鏡的結(jié)構(gòu)如圖 3—2 所示，它主要由底座、鏡筒、目鏡、物鏡、載物臺、光闌、集光器、調(diào)焦機(jī)構(gòu)等組成。顯微鏡的總放大倍數(shù)等于物鏡放大倍數(shù)與目鏡放大倍數(shù)的乘積（物鏡、目鏡的放大倍數(shù)都標(biāo)于鏡頭側(cè)面）。

用顯微鏡觀察纖維時(shí)的操作步驟如下：

1.將顯微鏡面對北光，扳動鏡臂，使其適當(dāng)傾斜（老式顯微鏡無法調(diào)節(jié)），以適應(yīng)自己能較舒適地坐著觀察。

2.將適當(dāng)倍數(shù)的目鏡放在鏡筒上，再將低倍物鏡轉(zhuǎn)至鏡筒中心線上，以便調(diào)焦。

3.將集光器升至最高位置，并開啟光闌至最大，用一目自目鏡向下觀察，調(diào)節(jié)反光鏡，使整個(gè)視野呈一最強(qiáng)而均勻的光度為止。

4.除去目鏡，觀察物鏡后透鏡，調(diào)節(jié)反光鏡的集光器中心，使在物鏡后透鏡處光線均勻明亮，再調(diào)節(jié)光闌 ，使明亮光闌與物鏡后透鏡大小相一致或稍小些。

5.裝上目鏡，用粗調(diào)裝置將鏡筒稍許升高，將試樣放在載物臺上機(jī)械移動裝置內(nèi)。

6.再旋轉(zhuǎn)粗調(diào)節(jié)裝置，將物鏡下移至最低位置，即物鏡盡量接近蓋玻片，但注意務(wù)必不能使物鏡觸及蓋玻片。這時(shí)，操作者眼睛一定霜注視物鏡下移，以免損壞鏡頭。

7.移動載物臺上的機(jī)械移動裝置，即調(diào)節(jié)前后、左右兩個(gè)旋鈕，使試樣移在物鏡中心。

8.自目鏡下視，用粗調(diào)裝置慢慢升起鏡筒，至見到試樣時(shí)立即停止。如不能見到試樣，則反復(fù)進(jìn)行第 6、7、8步驟。

9.見到試樣后，再調(diào)節(jié)微調(diào)裝置，使試樣成像清晰。

10.如需采用高倍物鏡（一般纖維縱向只需用低倍物鏡觀察，纖維斷面形態(tài)可用高倍的物鏡觀察），則按上述方法先用低倍物鏡調(diào)節(jié)，得到清晰的成像后，在不改變鏡筒位置情況下，轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器，使高倍物鏡代替低倍物鏡，然后自目鏡觀察。如成像不夠清晰，只要稍稍旋轉(zhuǎn)微調(diào)裝置，即能得到清晰的物像。如果換成高倍物鏡后，視野中不見物像，則需稍微移動機(jī)械移動裝置，就可找到物像。

11.顯微鏡調(diào)節(jié)完畢后，將所制得的縱面及斷面制片逐一放在載物臺移動尺內(nèi)，在目鏡中觀察各種纖維的縱、橫斷面形態(tài)。

12.試驗(yàn)完畢，用擦鏡紙交顯微鏡擦干凈。

 

描繪纖維的縱、橫斷面形態(tài)。